Elektroforeesi: mitä se on, mihin se on ja miten se tehdään

Sisältö

• Mitä varten se on
• Kuinka se tehdään
• Elektroforeesityypit
• 1. Hemoglobiinielektroforeesi
• 2. Proteiinien elektroforeesi

Elektroforeesi on laboratoriotekniikka, jonka tarkoituksena on erottaa molekyylit niiden koon ja sähkövarauksen mukaan, jotta voidaan diagnosoida taudit, varmistaa proteiinin ilmentyminen tai tunnistaa mikro-organismit.

Elektroforeesi on yksinkertainen ja edullinen menetelmä, jota käytetään laboratoriorutiinissa ja tutkimushankkeissa. Elektroforeesin tarkoituksen mukaan voi olla tarpeen suorittaa muita testejä ja tenttejä esimerkiksi diagnoosin saamiseksi.

Mitä varten se on

Elektroforeesi voidaan suorittaa eri tarkoituksiin sekä tutkimushankkeissa että diagnoosissa, koska se on yksinkertainen ja edullinen tekniikka.Siten elektroforeesi voidaan suorittaa:

• Tunnista virukset, sienet, bakteerit ja loiset, kun tämä sovellus on yleisempi tutkimushankkeissa;
• Isyyskoe;
• Tarkista proteiinien ilmentyminen;
• Tunnista mutaatiot, jotka ovat hyödyllisiä esimerkiksi leukemian diagnosoinnissa;
• Analysoi kiertävän hemoglobiinin tyypit, mikä on hyödyllistä sirppisoluanemian diagnosoinnissa;
• Arvioi veressä olevien proteiinien määrä.

Elektroforeesin tarkoituksen mukaan saattaa olla tarpeen suorittaa muita täydentäviä testejä lääkärille diagnoosin täydentämiseksi.

Kuinka se tehdään

Elektroforeesin suorittamiseksi tarvitaan geeli, joka voi olla polyakryyliamidi tai agaroosi käyttötarkoituksesta riippuen, elektroforeesipuskuri ja -säiliö, molekyylipainomarkkeri ja fluoresoiva väriaine UV- tai LED-valolaitteen lisäksi, joka tunnetaan myös nimellä transilluminaattori.

Geelin valmistamisen jälkeen on asetettava tietty esine niin, että kuopat tehdään geeliin, jota kutsutaan yleisesti kammiksi, ja anna geelin kovettua. Kun geeli on valmis, levitä aineet vain kuoppiin. Tätä varten molekyylipainomarkkeri on sijoitettava yhteen kuopasta, positiivinen kontrolli, joka on aine, joka tiedetään mikä se on, negatiivinen kontrolli, joka takaa reaktion pätevyyden, ja analysoitavat näytteet. Kaikki näytteet on sekoitettava fluoresoivaan väriaineeseen, koska tällä tavalla on mahdollista visualisoida nauhat läpivalaisimessa.

Näytteitä sisältävä geeli on asetettava elektroforeesiastiaan, joka sisältää spesifisen puskuriliuoksen, ja sitten laite kytketään päälle niin, että on sähkövirta ja siten potentiaaliero, mikä on tärkeää erotushiukkasille niiden niiden mukaan kuorma ja koko. Elektroforeettinen käyntiaika vaihtelee toimenpiteen tavoitteen mukaan ja voi kestää jopa tunnin.

Määritetyn ajan kuluttua on mahdollista tarkastella tulosta elektroforeettisesta ajon läpi läpivalaisimen. Kun geeli asetetaan UV- tai LED-valoon, on mahdollista visualisoida raitakuvio: mitä suurempi molekyyli, sitä pienempi sen migraatio, kun se lähestyy kaivoa, ja mitä kevyempi molekyyli, sitä suurempi on migraatiopotentiaali.

Reaktion validoimiseksi positiivisen kontrollin vyöhykkeet on visualisoitava eikä negatiivisessa kontrollissa saa mitään visualisoida, koska muuten se on osoitus kontaminaatiosta, ja koko prosessi on toistettava.

Elektroforeesityypit

Elektroforeesi voidaan suorittaa eri tarkoituksiin, ja tarkoituksensa mukaan voidaan käyttää useita erilaisia ​​geelejä, yleisimpiä ovat polyakryyliamidi ja agaroosi.

Elektroforeesi mikro-organismien tunnistamiseksi suoritetaan yleisemmin tutkimuslaboratorioissa, mutta diagnostisiin tarkoituksiin elektroforeesia voidaan käyttää tunnistamaan hematologiset sairaudet ja sairaudet, jotka kehittyvät proteiinien määrän lisääntyessä, mikä on tärkein elektroforeesityyppi:

1. Hemoglobiinielektroforeesi

Hemoglobiinielektroforeesi on laboratoriotekniikka, jolla tunnistetaan veressä kiertävät erityyppiset hemoglobiinit, mikä mahdollistaa hemoglobiinisynteesiin liittyvien sairauksien tunnistamisen. Hemoglobiinityyppi tunnistetaan elektroforeesin avulla tietyssä pH: ssa, mieluiten välillä 8,0 - 9,0, nauhakuvion avulla, jota voidaan verrata normaaliin kuvioon, mikä mahdollistaa epänormaalien hemoglobiinien tunnistamisen.

Mille se on tehty: Hemoglobiinielektroforeesi suoritetaan hemoglobiinisynteesiin liittyvien sairauksien, kuten sirppisoluanemian ja hemoglobiini C -taudin, tutkimiseksi ja diagnosoimiseksi sen lisäksi, että se on hyödyllinen talassemian erilaistamisessa. Opi tulkitsemaan hemoglobiinielektroforeesi.

2. Proteiinien elektroforeesi

Proteiinielektroforeesi on lääkäri pyytänyt tutkimusta veressä kiertävien proteiinien määrän arvioimiseksi ja siten sairauksien tunnistamiseksi. Tämä tutkimus tehdään verinäytteestä, joka sentrifugoidaan plasman, veren osan, muun muassa proteiinien, saamiseksi.

Elektroforeesin jälkeen vyöhykekuvio voidaan visualisoida ja sen jälkeen käyrä, johon on merkitty kunkin proteiinifraktion määrä, mikä on diagnoosin perustekijä.

Mille se on tehty: Proteiinielektroforeesin avulla lääkäri voi tutkia multippelimyelooman, dehydraation, kirroosin, tulehduksen, maksasairauden, haimatulehduksen, lupuksen ja verenpainetaudin esiintymisen vyöhykekuvion ja tutkimusraportissa esitetyn kaavion mukaisesti.

Ymmärrä, miten se tehdään ja miten ymmärtää proteiinielektroforeesin tulos.